單光束紫外可見分光光度計檢測的核心原理
單光束紫外可見分光光度計是基于朗伯-比爾定律設計的光學分析儀器，其核心工作原理是通過單束光源依次照射樣品池和參比池，測量樣品對特定波長紫外/可見光的吸收程度。儀器主要由光源系統（氘燈/鎢燈）、單色器、樣品室、檢測器（光電倍增管或CCD）及數據處理模塊組成，具有操作簡便、成本較低的特點，廣泛應用于化學、生物、醫藥和環境等領域的定量分析與質量控制。
核心檢測項目及具體應用
1. 溶液濃度定量分析
通過標準曲線法測定樣品中特定物質的濃度，適用于蛋白質（Bradford法）、核酸（A260/A280）、藥物活性成分等檢測。采用3點校準法建立標準曲線時，線性相關系數應≥0.999。
2. 物質純度評估
利用特征吸收峰比值法判斷樣品純度，如DNA純度檢測要求A260/A280在1.8-2.0之間。需注意高濃度樣品需稀釋至吸光度0.2-0.8的線性區間。
3. 反應動力學監測
通過時間驅動模式連續記錄酶促反應或化學反應的吸光度變化，計算反應速率常數。典型應用包括過氧化氫酶活性測定（240nm監測H2O2分解）。
4. 穩定性研究
采用加速試驗法評估光敏物質穩定性，在特定波長下持續監測樣品吸光度變化，要求RSD≤2%時判定穩定性合格。
特殊檢測模式應用
多組分同步分析
通過等吸收點法或矩陣計算解析混合組分，如復方藥物中雙組分含量測定時，需在雙波長處分別測定并建立聯立方程。
環境污染物檢測
依據國標方法進行重金屬檢測（如鉛的PAR顯色法檢測波長520nm），需嚴格控制顯色劑用量和反應時間，檢出限可達0.05mg/L。
檢測質量控制要點
檢測前需進行基線校正和波長準確性驗證（使用鈥玻璃濾光片），比色皿配對誤差應＜0.5%。日常維護需定期更換干燥劑，每月進行光度重復性測試（重鉻酸鉀溶液RSD≤0.3%）。
儀器性能驗證標準
按照JJG 178-2007規程，波長準確度偏差應≤±1nm，透射比重復性≤0.3%，雜散光＜0.05%T（NaI溶液測定220nm處）。檢測報告需包含儀器型號、檢測條件、標準曲線方程及R2值等完整信息。
掃一掃關注公眾號
