綠僵菌、白僵菌生物農藥檢驗操作規程檢測項目詳解

綠僵菌（Metarhizium spp.）和白僵菌（Beauveria spp.）作為重要的生物農藥，在可持續農業中發揮著關鍵作用。其檢驗操作規程的制定與執行是確保產品質量、安全性和防治效果的核心環節。本文針對綠僵菌和白僵菌生物農藥的檢測項目展開詳細說明，涵蓋菌劑活性、純度、安全性等關鍵指標，為生產企業、質檢機構及科研單位提供標準化操作參考。

一、活孢子含量檢測

活孢子數量是衡量生物農藥有效性的核心指標。檢測需采用血球計數板法或平板稀釋培養法，結合顯微鏡觀察和菌落計數。操作中需注意孢子懸浮液的均勻性，并通過染色法（如臺盼藍染色）區分活孢子與死孢子。標準要求每克制劑活孢子數不低于標注值的90%，且符合行業規定的有效閾值（通常≥1×10^8 CFU/g）。

二、菌種純度檢測

通過選擇性培養基（如PDA培養基）進行雜菌污染檢測，需設置30℃和35℃雙溫區培養，觀察72小時內是否出現非目標菌落。同時結合顯微鏡形態學鑒定，確保菌絲及孢子形態特征符合綠僵菌/白僵菌的典型特征。雜菌率需嚴格控制在≤1%范圍內，且不得檢出病原性微生物。

三、致病力生物測定

采用標準試蟲（如東亞飛蝗或棉鈴蟲幼蟲）進行毒力試驗。需配制1×10^7孢子/mL的懸浮液，通過浸漬法或飼料混毒法處理試蟲，記錄LT50（半數致死時間）和LC50（半數致死濃度）。合格菌株應滿足LT50≤7天（25℃條件下），且與標準菌株毒力差異不超過15%。

四、安全性檢測

包括非靶標生物安全性和環境安全性評估。對蜜蜂、家蠶等有益生物進行接觸毒性試驗，要求死亡率≤10%；土壤及水體降解試驗需驗證14天內孢子存活率下降至初始值的5%以下。同時需進行哺乳動物急性經口毒性試驗，確保LD50＞5000 mg/kg，符合無毒級標準。

五、理化穩定性檢測

通過加速儲存試驗（54℃±2℃儲存14天）和常溫留樣試驗，測定孢子存活率下降幅度。合格產品應滿足加速試驗后存活率≥80%，常溫儲存12個月存活率≥60%。同時檢測制劑的pH值（5.5-7.0）、含水量（≤8%）及懸浮率（≥90%）等理化指標。

以上檢測項目需嚴格參照《農藥登記毒理學試驗方法》（GB/T 31270）、《微生物農藥質量評價導則》（NY/T 3153）等標準執行，并定期進行方法學驗證。規范的檢測流程不僅保障生物農藥的田間防效，更是推動綠色植保技術發展的基礎支撐。